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ELISA检测试剂盒显色淡,灵敏度偏低是什么原因

更新时间:2021-07-28      浏览次数:1441


仁捷生物ELISA检测试剂盒显色淡,灵敏度偏低是什么原因,小编帮您找一下原因:
以下几点,请注意看哦

问题

序号

可能原因

解决方法

显色淡,灵敏度偏低

1

 试剂盒未充分平衡

试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)

2

 样品不适合做ELISA检测

样品一般选择培养上清、血清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分)

3

 酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥

防止板过于干燥

4

 包被抗体遭到破坏

操作温和,移液枪不能碰到孔底

5

 样本和抗体孵育条件不合适

按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。

6

 洗涤浸泡时间过长

按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间;

7

 偶联HRP试剂污染

弃去试剂,重新配置

8

 错误的稀释偶联HRP试剂

弃去试剂,重新配置

9

 TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间

确定合适的孵育时间:人为判定-最高浓度的标准品出现深蓝色;S4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65

10

 样本浓度过高或存在基质效应

建议做不同稀释倍数,确认样本最佳稀释倍数。

11

 酶标仪滤光片设置有问题或者波长选择不对

确认仪器设置及选择正确的波长检测。

12

 酶标板不适合做ELISA

不能使用细胞培养板,建议使用ELISA专用高吸附力板子。


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